Estudo de fatores de risco genéticos que predispöem à aterosclerose em quatro comunidades afro-brasileiras de Mato Grosso do Sul / Genetics risk factors study that premake use to atherosclerosis in four afro-Brazilians communities from Mato Grosso do Sul

Avaliou-se em 184 indivíduos afro-brasileiros de quatro comunidades de Mato Grosso do Sul, com história familiar de alta prevalência de doenças cardiovasculares e acidente vascular cerebral, a associação entre o polimorfismo I/D do gene da enzima conversora da angiotensina (ECA) com a hipertensão, assim como o defeito dos polimorfismos I/D do peptídeo sinalizador do gene da apo B e da apo E sobre as concentrações séricas de lipídeos. As regiões polimórficas dos genes foram amplificadas pela reação em cadeia pela polimerase e os fragmentos obtidos foram caracterizados por eletroforese em gel de agarose a 2 por cento e poliacrilamida a 10 por cento para o polimorfismo da ECA e peptídeo sinalizador da apo B, respectivamente...

Modulation of biochemical activity of hepatocytes in culture by matrix substratum.

The influence of extra cellular matrix on the biochemical activity of hepatocytes was studied by maintaining rat hepatocytes in primary culture in a serum free medium on different matrix protein substrata or biomatrices prepared from liver, aorta or mammary gland. There was significant difference in the individual protein synthesis and distribution by cells maintained on different substrata. Comparison of the kinetics of synthesis and secretion of albumin by cells maintained on different tissue biomatrix showed that those maintained on hepatic biomatrix synthesized more albumin and retained more of albumin synthetic capacity, when compared to those maintained on aortic and mammary gland biomatrix. Similarly, hepatocytes maintained on hepatic biomatrix synthesized significantly more apo B, the major apo protein of VLDL, than those maintained on heterologous tissue matrix. Induction of tyrosine aminotransferase by dexamethasone and the uptake of [14C]-amino isobutyric acid were found to be maximum in cells maintained on liver biomatrix than the heterologous biomatrix. But cells maintained on hepatic biomatrix incorporated less amounts of radioactivity into total cytoskeletal proteins as well as the individual proteins such as actin and the cytokeratins C8 and C18 while that by cells maintained on aortic biomatrix was significantly high. Quantitative analysis of the relative incorporation of radioactivity into individual cytoskeletal proteins and albumin in pulse labelling studies with cells maintained in culture on different matrix for different lengths of time revealed a reciprocal relationship between these two activities. These results indicate that the substrata with which the cells are in contact influence on a selective basis, the biochemical activity of hepatocytes in primary culture.

Apoliproteínas A-I y B-100 y enfermedad coronaria comprobada angiográficamente

Objetivo : establecer la correlación de las apolipoproteínas (APO) A-I y B-100 séricas , con la enferemdad coronaria (EC) y su severidad. Método: estudio abierto, prospectivo y análitico en 52 pacientes sometidos a angiocoronariografía de abril a septiembre de 1991, tomando previamente muestra de sangre para medición de colesterol (CT), triglicéridos (TG), HDL, APO-AI y APO B-100 y determinación de LDL, índice aterogénico (IA), LDL/HDL y relación APO A1/B-100. Sitio : Servicio universitario de referencia de pacientes de atención terciaria. Principales resulatdos : 65.4 por ciento de los pacientes fueron hombres y 34.6 por ciento, mujeres; 67.3 por ciento tenían EC y 32.7 por ciento nola tenían. Entre los grupos con y sin EC hubo diferencia significativa en todas las variables medidas, especialmente en el CT, cuya media era de 210+-51 mg por ciento en el grupo sin EC y de 255+-48 mg por ciento en el grupo con EC (p=0.0006), y en la relación APO-AI/B-100, que fue de 2.08+-0.49 para el grupo sin EC y de 1.18+-0.51 para elgrupo con EC (p=0001). Entre hombres y mujeres fueron significativamente diferentes las la APO-AI (p=0.004) y la relación APO-AI/B-100 (p=0.003). Ninguna variable diferenció el grupo con EC leve del grupo sin EC, pero sí diferenciaron la ausencia de EC de lapresencia de EC moderada y severa el CT, APO-AI, APO-AI/B-100, IA y LDL/HDL. En la regresión lineal el grado EC pependió significativamente de APO-AI/B-100 (r=0.73, p<0.001), APO-B-100 (r+0.60, p<0.001), LDL/HDL (r=0.51, p<0.001) y CT (r=0.50, p=<0.001). En la regresión múltiple la presencia de EC dependió de la relación APO-AI/B-100 (r=0.73) y del colesterol total (r=0.50). Conclusiones : el índice APO-AI/B-100 mejoró de manera importante la correlación con la presencia de EC con respecto a las demás variables, no así la medición de APO-AI y B-100 por separado. Esta misma relación no discriminó la ausencia de EC de la EC leve, pero si la ausencia de EC de la EC moderada y severa.

Synthesis and secretion of VLDL by rat hepatocytes--modulation by cholesterol and phospholipids.

The synthesis and secretion of apoB, the major protein component of very low density lipoprotein (VLDL) and low density lipoprotein (LDL), were studied using rat hepatocytes maintained in primary culture. Supplementation of hepatocytes with rat serum VLDL and LDL increased the production of apoB while delipidated lipoproteins had no significant effect, suggesting a role for lipids in the production of apoB. Addition of cholesterol to the culture medium also increased the production of apoB in a concentration-dependent manner. Pulse labelling followed by chase in presence of cholesterol indicated enhancement in apoB secretion. Mevinolin which inhibits cholesterol synthesis significantly reduced the secretion of apoB. The presence of phosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine in the culture medium also increased the secretion of apoB into the medium. These data suggest that availability of lipids, particularly cholesterol, is an important determinant of apoB synthesis and secretion as VLDL.

Efecto de las lipoproteínas ricas en triglicéridos sobre la relación entre C-LDL y Apo B determinada por EID en suero total: I. indicadores de riesgo para la enfermedad coronaria. Valores de Apo B/C-HDL / Effect the triglyceride rich lipoproteins upon the relation between C-LDL and Apo B determined by EID in total serum: I.rick indications of coronary disease. Values of Apo B/C-HDL

En este trabajo se determinaron los valores promedio, desviación estándar y percentilos para el cociente Apo B/C-HDL y, por otra parte, se analizó el efecto de las lipoproteínas ricas en triglicéridos sobre la relación entre C-LDL y Apo B, determinada por electroinmunodifusión en suero total. Se estudiaron 74 individuos de 20 y más años, aparentemente sanos. Para Apo B/C-HDL se obtuvo un valor medio de 2,16+0,78. El percentilo 50 fue 2,00, el percentilo 75 fue 2,60 y el percentilo 95 fue 3,60. Los individuos con Apo B/C-HDL>3,60 estarían en riesgo respecto de la aterosclerosis coronaria. La relación entre C-LDL y Apo B, es importante para la detección de sujetos con hiperapo B, la cual está fuertemente relacionada con la aterosclerosis coronaria. Utilizando los triglicéridos como estimadores de masa de las lipoproteínas ricas en triglicéridos, se halló que mientras TG<160 mg/dl la correlación entre Apo B y C-LDL fue r= +0,65,P <0,001. Un 86% de los pacientes con C-LDL entre 80 y 165 mg/dl tenían Apo B entre 55 y 120 mg/dl, mientras que un 12% tenían Apo B por encima de 120 mg/dl. En estos pacientes se puede suponer la presencia de hiperapo B en estas condiciones experimentales. Cuando TG>160 mg/dl, la correlación entre Apo B y C-LDL disminuye a r=+0,39,P<0,1. Un 21% de los pacientes con C-LDL entre 80 y 165 mg/dl tenían Apo B entre 55 y 120 mg/dl, pero un 79% tenían Apo B por encima de 120 mg/dl. En estas condiciones experimentales no se podrían discriminar los pacientes con hiperapo B.

Comparación de la cuantificación de ApoB lipoproteínas, utilizando anticuerpos monoclonales y policlonales mediante técnicas inmunoenzimáticas tipo ELISA / Comparison of cuantitation of ApoB lipoproteins using monoclonal and policlonal antibodies by an ELISA method

Se realizó la determinación de los niveles de ApoB en muestras de suero obtenidas de sangre de cordón umbilical de recién nacidos, empleando para ello sistemas inmunoenzimáticos ELISA tipo sandwich. Las variantes de ELISA evaluadas fueron: anticuerpos policlonales de captura y anticuerpos policlonales conjugados con peroxidasa en el revelado (policlonal), anticuerpo monoclonal (AcM) IA/CB-LDL.1 de captura y anticuerpos policlonales en el revelado (combinada), y AcM IA/CB-LDL.1 de captura y AcM IA/CB-VLDL.2 conjugado en el revelado (monoclonal). La correlación entre los valores de concentración de ApoB medidos por las variantes monoclonales y policlonal, así como policlonal y combinada, fueron de r = 0,81 y 0,83 respectivamente. La correlación entre las variantes "monoclonal" y "combinada" fue mayor, para r = 0,961. El AcM empleado en la fase sólida probablemente determina en estos dos últimos casos la especificidad del sistema. Se encontró una ligera tendencia hacia valores más altos, en las muestras de mayor concentración de ApoB, para los sistemas que empleaban el AcM IA/CB-LDL.1 como anticuerpo de captura, lo que pudiera interpretarse como que este reconoce determinantes antigénicos presentes en variantes estructurales de esta molécula, más representados en algunos individuos, y cuya significación es objeto de estudios actuales.